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var cadena = "hola",
    penultima = cadena.length - 2;
    porcion = cadena.substr(penultima),
    reemplazo = "yo";

document.body.innerHTML = "Cadena: " + cadena + "<br />";
document.body.innerHTML += "Dos últimas: " + porcion + "<br />";
document.body.innerHTML += "Reemplazo: " + reemplazo + "<br />";
document.body.innerHTML += "Final: " + cadena.replace(porcion, reemplazo);